《抗Tim-3單抗聯(lián)合化療藥物對同種異體造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)和黑色素瘤的治療研究》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《抗Tim-3單抗聯(lián)合化療藥物對同種異體造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)和黑色素瘤的治療研究（3頁珍藏版）》請在裝配圖網上搜索。

1、 抗 Tim-3 單抗聯(lián)合化療藥物對同種異體造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)和黑色素瘤的治療研究 第一部分抗 Tim-3 單抗體聯(lián)合環(huán)磷酰胺對同種異體骨髓造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)的治療研究目的 : 建立小鼠同種異體骨髓造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)模型 , 探討抗 Tim-3 單抗體聯(lián)合環(huán)磷酰胺對此模型的治療效果及其可能的機制 , 為臨床上治療移植后白血病復發(fā)開創(chuàng)了新的方法。方法 :1. 以雌性 C57BL/6 小鼠為供鼠、接受 8Gy全身照射的 BALB/c 小鼠作為受鼠進行同種異體骨髓移植 , 移植物中包 括 1X107骨髓細胞 ,5X106 脾細胞和 1X1

2、06A20細胞 , 建立小鼠骨髓造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)模型。 2. 根據小鼠的臨床表現(xiàn)、 外周血細胞計數(shù)和外周血圖片判斷小鼠骨髓造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)模 型是否成功。3. 根據治療方案的不同 , 受鼠隨機分為 4 組: 同型對照組 , 抗 Tim-3 單抗組 , 環(huán)磷酰胺組與聯(lián)合環(huán)磷酰胺和抗 Tim-3 單抗組。觀察各組小鼠的生存時間 , 流式細胞術檢測小鼠外周血和脾臟淋巴細胞 中 CD4+ T 細胞、 CD8+ T 細胞、 CD3+CD4+CD25+FoxP3+ Treg細胞和 CD3+CD8+Granzyme B 細T胞的比例。結果 : 小

3、鼠骨髓造血干細胞移植 后淋巴瘤復發(fā)模型建立成功。 抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺聯(lián)合使用顯著 提高移植后淋巴瘤復發(fā)小鼠生存期 ( 平均提高 7.2 天,P<0.05) 。與 同型對照組相比  , 抗  Tim-3  單抗組升高了受鼠外周血和脾臟  CD4+T細 胞的比例  ( 外周血中升高了  10.1%,  脾臟中升高了  2.2%,P<0.05), 環(huán)磷酰胺組能使受鼠脾臟 CD4+T細胞的比例顯著下降 ( 下降了

4、 19.1%,P<0.01) 。與同型對照相比 , 抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺聯(lián)合 用藥顯著降低了骨髓移植后免疫抑制性 Treg 細胞的比例 ( 外周血中 降低了 1.55%, 脾臟中降低了 1.86%,P<0.01), 提高骨髓移植后 CD8+T淋巴細胞中顆粒酶 B+的細胞毒性 T 淋巴細胞的比例 ( 外周血中 升高了 6.84%, 脾臟中升高了 5.47%,P<0.001), 恢復 CD4/CD8T細 胞的比值。結論 :CD4+T細胞、 CD8+T細胞和 Treg 細胞以及 CTL在移 植

5、后淋巴瘤復發(fā)中起重要作用 , 聯(lián)合抗 Tim-3 單抗和環(huán)磷酰胺治療同 種異體骨髓造血干細胞移植后淋巴瘤復發(fā)有效。 第二部分抗 Tim-3 單 抗聯(lián)合曲美替尼對黑色素瘤的治療研究目的 : 探討抗 Tiim-3 單抗體 聯(lián)合曲美替尼對此模型的治療效果及其可能的機制 , 為臨床上治療黑 色素瘤提供新的思路。 方法 : 建立小鼠黑色素瘤皮下移植瘤模型 , 根據 治療方案的不同 , 小鼠隨機分為 4 組: 對照組 , 抗 Tim-3 單抗組 , 曲美替 尼組與聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗組。比較各組小鼠腫瘤體積的大 小,

6、繪制生長曲線 , 流式細胞術檢測各組小鼠腫瘤浸潤淋巴細胞中 CD4+T 細胞和 CD8+T 細胞的比例以及其中 Tim-3+細胞的比例。免疫組化分析各組小鼠腫瘤 Ki67 和 Caspase-9 的陽性率差異。 CCK-8法檢測在體外實驗中各組對 B16F10細胞株增殖的影響。 結果 : 與對照組 相比 , 曲美替尼能明顯抑制 B16F10細胞的生長 , 最高的抑制率發(fā)生在 4h, 曲美替尼組與聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗組的抑制率分別為 22.3 0.83%,23.0 1.11%,P<0.01 。與對照相比曲美替尼組和聯(lián) 合曲美替尼和抗 T

7、im-3 單抗組 ,Caspase-3 陽性率明顯升 高 ,P<0.01; 而 Ki67 陽性率明顯降低 ,P<0.01 。聯(lián)合曲美替尼和 抗 Tim-3 組的小鼠在第 23 天的腫瘤大小的抑制率為 40.8 2.19%,P<0.01 腫瘤體積明顯得到抑制。與對照組相比 , 抗 Tim-3 單抗組腫瘤浸潤淋巴細胞中 CD8+T細胞比例明顯升高 , 曲美替尼組腫 瘤浸潤 CD8+ T細胞中 Tim-3+CD8+ T 細胞的比例升高了 2 倍。結論 : 曲美替尼能通過促進腫瘤細胞凋亡和抑制腫瘤細胞生長來發(fā)揮對 B16F10黑色素瘤的抗腫瘤能力?？?Tim-3 單抗能明顯升高黑色素瘤 小鼠中 CD8+ T細胞從而增加抗腫瘤的免疫應答。聯(lián)合曲美替尼和抗 Tim-3 單抗治療黑色素瘤有強大的抗腫瘤效果。