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基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實驗技術(shù),基本操作技術(shù) 溶液的配制 緩沖溶液,基 本 操 作 技 術(shù),溶液的配制,緩沖溶液,P39,P40,P8,,實驗一 基本操作技術(shù),實驗?zāi)康?掌握玻璃儀器的清洗； 學(xué)會正確使用吸量管、微量移液器、酒精計、粗天平的使用。 玻璃儀器 燒杯、試管、量杯、量筒、刻度吸量管、滴管等。,,實驗一 基本操作技術(shù),一、玻璃儀器的洗滌與清潔 （一）新購玻璃儀器的清洗,清水沖,沾洗衣粉刷,清水沖,蒸餾水洗,,,,,（二）使用過的玻璃儀器清洗,1.一般玻璃儀器,清水沖,沾洗衣粉刷,清水沖,,,,蒸餾水洗,2.容量儀器,清水沖,,鉻酸洗液浸泡,清水沖,,蒸餾水洗,,3.比色杯,清水沖,,鹽酸洗液浸泡,清水沖,,蒸餾水洗,,,二、刻度吸量管的使用 量取10ml以下的任意體積時用。 刻度標(biāo)記有兩種： 上為零刻度，下為總量刻度； 上為總量刻度，下為零刻度的。 放液后，將吸量管尖在容器內(nèi)壁上垂直停留15秒即可。,實驗一 基本操作技術(shù),,近年來為了便于準(zhǔn)確快速地選取吸量管，國際標(biāo)準(zhǔn)化組織統(tǒng)一規(guī)定：在刻度吸量管的上方印上各種彩色環(huán)，以利辨別，其容積標(biāo)志如下表：,實驗一 基本操作技術(shù),,實驗一 基本操作技術(shù),吸量管的使用,選擇,執(zhí)管,取液,調(diào)準(zhǔn)刻度,放液,洗滌,,三、微量移液器的使用 1.調(diào)體積選取鈕至所需數(shù)值。 2.套上吸嘴，旋緊。 3.垂直持握微量移液器外殼，按下大拇指至取液按鈕。 4.將微量移液器吸嘴插入溶液，徐徐松開大拇指，使其復(fù)原。 5.排放時，重新將大拇指按下，比取液時高一檔以排空。 注：移液過程中應(yīng)控制速度，力度。如需移取另一樣品，按吸嘴排放鈕，更換吸嘴。,實驗一 基本操作技術(shù),,四、酒精表的使用 選擇酒精表的測試范圍在70%～80% v/v。 在沒有其他量器的條件下，將酒精以適量蒸餾水稀釋，用酒精表檢測濃度，當(dāng)刻度指向75時即為消毒酒精。,實驗一 基本操作技術(shù),,五、托盤天平的使用 1．調(diào)零點 2. 稱量 稱量時，左放物，右放碼。,實驗一 基本操作技術(shù),,3.稱量完畢 砝碼放回砝碼盒中，游碼移至刻度“0”處，天平的兩個托盤重疊后，放在天平的一側(cè)，使天平休止，以保護天平的刀口。,實驗一 基本操作技術(shù),,實驗?zāi)康?熟悉三種濃度溶液配制；學(xué)習(xí)配制常用醫(yī)用溶液 一、儀器與試劑 （一）儀器 托盤天平、量筒（100ml、）、100ml燒杯、刻度吸管（10ml、5ml）、容量瓶（50ml）酒精計、玻璃棒、藥匙、毛刷。 （二）試劑 95%乙醇、NaCl固體、新潔爾滅、TD。,實驗二 溶液的配制,,實驗二 溶液的配制,1.75%酒精的配制： ① 用95%（ml/ml)酒精配制75%的酒精50mL。 ② 用酒精表測75%的酒精度 2.配制0.1%新潔爾滅溶液50ml 3.配制生理鹽水50ml。 4.制備1%TD消毒液10ml。,溶液的配制與稀釋,,1.緩沖原理： NaH2PO4—Na2HPO4 H2PO42- 是抗堿成分 HPO42- 是抗酸成分 在溶液加少量的堿時， OH-與H2PO42- 電離產(chǎn)生的H+生成H2O，使溶液的PH值不發(fā)生明顯變化。 在溶液加少量的酸時， H+與HPO42- 結(jié)合生成H2PO42- ，溶液的PH值也不發(fā)生明顯變化。 所以，緩沖溶液具有抗酸、抗堿的作用。,實驗三 緩沖溶液,,實驗三 緩沖溶液,2.配制緩沖溶液 用刻度吸管取濃度為0.2M Na2HPO4 5.0毫升，濃度為0.2M NaH2PO4 10.0毫升，混勻后用pH試紙測定其pH值。 用刻度吸管取濃度為0.2M Na2HPO4 10.0毫升，濃度為0.2M NaH2PO4 5.0毫升，混勻后用pH試紙測定其pH值。 問題：兩種比例不同的緩沖溶液pH值為何不同？,,3.緩沖溶液的抗酸、抗堿作用 將制好的兩種緩沖溶液各分成兩份，分別加入少量鹽酸及少量氫氧化鈉溶液，用pH試紙測定其pH值。 多加一些鹽酸及氫氧化鈉溶液后又有何變化，用pH試紙測定其pH值。,實驗三 緩沖溶液,,知識拓展,酒精又叫乙醇，是最常用的皮膚消毒劑，75％的酒精用于滅菌消毒；50％的酒精用于防褥瘡；20％～50％的酒精擦浴用于高熱病人的物理降溫。不同濃度的酒精都是由高濃度(95％)酒精用蒸餾水稀釋而成的。 酒精之所以能消毒是因為酒精能夠吸收細(xì)菌蛋白的水分，使其脫水變性凝固，從而達到殺滅細(xì)菌的目的。如果使用高濃度酒精，對細(xì)菌蛋白脫水過于迅速，使細(xì)菌表面蛋白質(zhì)首先變性凝固，形成了一層堅固的包膜，酒精反而不能很好地滲入細(xì)菌內(nèi)部，以致影響其殺菌能力。75％的酒精與細(xì)菌的滲透壓相近，可以在細(xì)菌表面蛋白未變性前逐漸不斷地向菌體內(nèi)部滲入，使細(xì)菌所有蛋白脫水、變性凝固，最終殺死細(xì)菌，酒精濃度低于75％時，由于滲透性降低，也會影響殺菌能力。,,實驗報告 1.名稱 2.目的 3.材料 4.方法 5.結(jié)果 6.分析,,Thank You !,天津醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部 生物化學(xué)教研室 呂學(xué)儒,