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38 西壯族自治區(qū) 地方標(biāo)準(zhǔn) 5/ T 2017 苦丁茶種子質(zhì)量要求 擊此處添加與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)一致性程度的標(biāo)識(shí) （征求意見(jiàn)稿） 布 施 廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān) 督局 發(fā)布 T 2016 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn) 按照 2009 給出的規(guī)則起草。 本標(biāo)準(zhǔn)由廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由廣西衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 化技術(shù)委員會(huì)歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位： 廣西壯族自治區(qū)中醫(yī)藥研究院 。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人 ： T 2016 1 苦丁茶種子質(zhì)量要求 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了苦丁茶 . J. 子的質(zhì)量要求、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、貯藏、運(yùn)輸 、生產(chǎn)檔案等 。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于廣西境內(nèi)生產(chǎn)和銷售的苦丁茶種子。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不 可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 扦樣 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 凈度分析 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 發(fā)芽試驗(yàn) 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 真實(shí)性和品種純度鑒定 農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 水分測(cè)定 7415主 要農(nóng)作物種子貯藏 2006 農(nóng)作物種子標(biāo)簽通則 國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局令（ 2005）第 75號(hào) 定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法 限數(shù)值的表示方法和判定方法 值修約規(guī)則 3 術(shù)語(yǔ)與定義 下列術(shù)語(yǔ)和定義適合于本標(biāo)準(zhǔn) 苦丁茶種子 系冬青科植物苦丁茶 . J. 種子批 同一來(lái)源，同一品種，同一采收期的質(zhì)量基本一致，在規(guī)定數(shù)量之內(nèi)的種子。 送驗(yàn)樣品 送到種子檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)、規(guī)定數(shù)量的樣品。 T 2016 2 試驗(yàn)樣品 在實(shí)驗(yàn) 室中從送驗(yàn)樣品中分出的部分樣品，供測(cè)定某一檢驗(yàn)項(xiàng)目之用。 4 質(zhì)量要求 苦丁茶種子質(zhì)量指標(biāo)見(jiàn)表 1。 表 1 苦丁茶種子 質(zhì)量指標(biāo) 級(jí)別 發(fā)芽率 /% 凈度 /% 千粒重 /g 水分 /% 一級(jí) ≥50 ≥35 二級(jí) 30～ 49 ＜ 35 5 檢驗(yàn)方法 見(jiàn)附錄 A。 6 檢驗(yàn)規(guī)則 以凈度、發(fā)芽率、千粒重指標(biāo)為劃分種子質(zhì)量級(jí)別的依據(jù)。凈度、發(fā)芽率、千粒重各定一個(gè)指標(biāo)，其中一項(xiàng)達(dá)不到一級(jí)指標(biāo)的降為二級(jí)，其中一項(xiàng)達(dá)不到二級(jí) 指標(biāo)的即為不合格種子。水分一項(xiàng)達(dá)不到指標(biāo)的即為不合格種子 ?？喽〔璺N子質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單內(nèi)容格式見(jiàn)附錄 B。 7 標(biāo)志、包裝、貯藏 按 0464－ 2006、國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局令（ 2005） 第 75號(hào) 定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法 、 7415行。 8 運(yùn)輸 種子在運(yùn)輸過(guò)程中必須做好防曬、防蟲(chóng)、防丟失、防損壞等工作。 T 2016 3 附錄 A 苦丁茶種子檢驗(yàn)方法 樣 參照 作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 扦樣執(zhí)行。 本品種 的種子批最大重量和樣品最小重量見(jiàn)表 表 種子批的最大重量和樣品最小重量 種子批的最大重量 品最小重量 /g 送檢樣品 凈度分析 1000 250 50 度分析 參照 作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 凈度分析執(zhí)行。 量測(cè)定 采用百粒法測(cè)定，測(cè)定程序如下： a） 將凈度分析后的全部?jī)舴N子均勻混合，分出一部分作為試驗(yàn)樣品。 b） 用手或數(shù)種器從試驗(yàn)樣品中隨機(jī)數(shù)取 8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù) 100粒，分別稱重（ g）， c） 按以下公式（ 1）、（ 2）、（ 3）計(jì)算 8個(gè)重復(fù)的平均重量 、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)： 平均百粒重（ X ） = ……………………………… （ 1） 式中： X —— 100粒種子的平均重量 /g； n—— 重復(fù)次數(shù)。 標(biāo)準(zhǔn)差（ S） =)1()()( 22??? ? ……………………… （ 2） 式中： X—— 各重復(fù)重量 /g； n—— 重復(fù)次數(shù)。 變異系數(shù) = 100?…………………… ……… （ 3） 式中： S —— 標(biāo)準(zhǔn)差； X —— 100粒種子的平均重量 /g。 T 2016 4 d） 如變異系數(shù)不超過(guò) 可計(jì)算測(cè)定的結(jié)果。如變異系數(shù)超過(guò) 4，則應(yīng)再測(cè)定 8個(gè)重復(fù)，并計(jì)算 16個(gè)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)差。凡與平均數(shù)之差超過(guò)兩倍標(biāo)準(zhǔn)差的重復(fù)略去不計(jì)。 e） 按以下公式（ 4）計(jì)算結(jié)果，結(jié)果精確至 g： 種子千粒重（ g） =（ X ） ×10 …………………………… （ 4） 式中： X —— 100粒種子的平均重量 /g。 分測(cè)定 參照 作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 水分測(cè)定執(zhí)行。 采用高溫烘干法測(cè)定，測(cè)定程序如下： a） 將樣品盒預(yù)先烘干，放入干燥器內(nèi)冷卻 30 45 果精確至 g），并記下盒號(hào)。 b） 稱取經(jīng)充分混合的送檢樣品約 20 g，用小型粉碎機(jī)粉碎 30 s，即磨碎細(xì)度應(yīng)達(dá)到至少有 50 %成分通過(guò) 0.5 留在 1.0 0%。 c） 取經(jīng)磨碎的充分混勻的試樣 2份，每份 9.0 g～ 11.0 g， 將試樣放入預(yù)先烘干并稱重過(guò)樣品盒內(nèi) ，再稱重（結(jié)果精確至 g）。 d） 使烘箱預(yù)先通電預(yù)熱至 145 ℃ ，將樣品攤平放入烘箱內(nèi)的上層，樣品盒距溫度計(jì)的水銀球約 2.5 速關(guān)閉烘箱門，使箱溫在 5 10 30℃ ～ 133℃ 時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，在130 ℃ ～ 133 ℃ 溫度下烘 1h。 e） 1 出放入干燥器內(nèi)冷卻 30 45 果精確至 g）。 f） 結(jié)果計(jì)算： 根據(jù)烘后失去的重量計(jì)算種子水分百分率，按以下公式（ 5）計(jì)算到小數(shù)點(diǎn)后一位： 種子水分（ %） =1232 M ??×100 ……………………………… （ 5） 式中： 1M —— 樣品盒和蓋的重量， g； 2M —— 樣品盒和蓋及樣品的烘前重量， g； 3M—— 樣品盒和蓋及樣品的烘后重量， g。 注：若一個(gè)樣品的兩次測(cè)定之間的差距不超過(guò) ，其結(jié)果可用兩次測(cè)定值的算術(shù)平均數(shù)表示 。否則，重做兩次測(cè)定。 T 2016 5 芽試驗(yàn) 參 照 作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 發(fā)芽試驗(yàn)執(zhí)行。 測(cè)定在規(guī)定的條件和時(shí)間內(nèi)長(zhǎng)成正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。從經(jīng)充分混合的凈種子中，用數(shù)種設(shè)備或手工隨機(jī)數(shù)取 400粒，每次重復(fù) 100粒， 4次重復(fù)，技術(shù)規(guī)定如下表 表 苦丁茶種子的發(fā)芽技術(shù)規(guī)定 發(fā)芽床 溫度， ℃ 初次計(jì)數(shù) 天數(shù)， d 末次計(jì)數(shù) 天數(shù)， d 附加說(shuō)明，包括破除休眠的建議 紙上（ 沙上（ 25 25 60 種子 硬實(shí) ，透水透氣性差， 需破除休眠后用 35℃ 浸種 20h～ 24 吸漲。破除硬實(shí)建議：砂紙打磨 種子 ， 濃硫 酸腐蝕 6 苗鑒定 參照《幼苗鑒定手冊(cè)》 A 葉留土發(fā)芽類型 常幼苗： a） 完整幼苗：幼苗具有生長(zhǎng)良好的初生根及次生根，上胚軸發(fā)育良好，有完整的 2片子葉，完全展開(kāi)的綠色初生葉 2片，完整的頂芽。 b） 帶有輕微缺陷的幼苗：幼苗的初生根有些許變色或枯斑；有可愈合的或淺度的裂縫或裂口；或初生根雖有缺陷， 但生長(zhǎng)有足夠數(shù)量的正常次生根。子葉沒(méi) 有功能部分少于原來(lái)組織的50 %。上胚軸有些許變色或枯斑；有可愈合的或淺度的裂縫、裂口或破損；有些許扭曲。初生葉沒(méi)有功能部分少于葉面積的 50 %，只有 1片初 生葉或 3片初生葉。 c） 次生感染的幼苗：幼苗明顯符合完整幼苗或帶有輕微缺陷正常幼苗的要求，但已受到不是來(lái)自種子本身的真菌或細(xì)菌的病源感染而致使幼苗的主要構(gòu)造發(fā)病和腐爛。 正常幼苗： a） 受損傷的幼苗：初生根殘缺或缺失，從根尖裂開(kāi)，次生根又很少或有缺陷。子葉分離或缺失。上胚軸有濃度裂縫或破損，且裂口穿透胚軸。初生葉破損面積超過(guò)葉面積 50 %。頂芽缺失。 b） 畸形或不勻稱的幼苗：初生根縮縊，或過(guò)于纖細(xì)，或陷在種皮內(nèi)，或負(fù)向地性，或呈玻璃體狀。子葉變色或壞死。上胚軸縮短增厚，或縮縊，或過(guò)度彎曲形成環(huán)狀、螺旋狀，或過(guò)于纖T 2016 6 細(xì)， 或呈玻璃體狀。初生葉卷曲或畸形，變色或壞死。整株幼苗畸形、兩株融合在一起、黃化或白化、纖細(xì)、呈玻璃體狀。 c） 腐爛幼苗：由種子本身攜帶的真菌或細(xì)菌引起的初生感染而致使幼苗發(fā)病或腐爛，以致妨礙其正常生長(zhǎng)的。 子真實(shí)性鑒定 參照 作物種子檢驗(yàn)規(guī)程 真實(shí)性和品種純度鑒定 執(zhí)行。 采用種子外觀形態(tài)法，通過(guò)對(duì)種子形態(tài)、大小、顏色等表面特征的鑒定能夠快速的檢驗(yàn)種子的真實(shí)性。鑒別依據(jù)見(jiàn)表 表 丁茶種子形態(tài)特征 類別 苦丁茶 . J. 種子 顏色與種皮特質(zhì) 種皮 黃棕色， 表面具 網(wǎng)狀紋理及溝， 石 質(zhì) 大小 千粒重 長(zhǎng) 7.0 7.5 4.0 5.0 形狀 種子 長(zhǎng)圓形 ；臍條明顯；胚乳白色， 2 片，呈橢圓形。 果皮 顏色與果皮特質(zhì) 核果，紅 色， 球形，宿存花萼 4 裂片，盤狀，內(nèi)含種子 4 粒。 子生活力測(cè)定 用生化測(cè)定法測(cè)定，種子預(yù)濕前需機(jī)械破皮，每次至少測(cè)定 200粒種子，每重復(fù) 100?；蛏儆?100粒的若干重復(fù)，技術(shù)規(guī)定如下表 表 苦丁茶種子四唑染色技術(shù)規(guī)定 染色前的準(zhǔn)備 預(yù)濕方式 預(yù)濕時(shí)間 h 溶液濃度 % 35℃ 染色時(shí)間， h 鑒定前的處理 有生活力種子允許不染色、較弱或壞死的最大面積 備注 沿平行種臍的遠(yuǎn)端切去種子的 30%，切口可見(jiàn)到胚乳。 紙間或水中 紙間 18～20；水中16～ 18 4（暗黑條件下） 除去種皮 胚根頂端 ≤1/3不染色，子葉遠(yuǎn)離胚根處 ≤2/3不染色 子健康測(cè)定 檢查種子攜帶病菌情況，測(cè)定程序如下： T 2016 7 a） 種子外部帶菌情況 從每份樣本中隨機(jī)選取 400粒種子 ，放入 100 入 40 取懸浮液 1 2000 r/速離心 10 上清液，再加入 1 00 μ 板培養(yǎng)基上，涂勻，每個(gè)處理 4次重復(fù)。相同操作條件下設(shè)無(wú)菌水空白對(duì)照。 25 ℃ 黑暗條件下培養(yǎng)，觀察記錄 b） 種子內(nèi)部帶菌情況 將破皮充分吸漲的種子將種皮和種仁分開(kāi)，用 5 %次氯酸鈉（ 液浸泡種皮 5 仁 3 菌水沖洗 3遍，將同一樣本的種皮和種仁均勻擺放在直徑 15 板培養(yǎng)基上，每皿擺放 100個(gè)分別來(lái)自 100粒種子的種皮或種仁組 織塊， 4次重復(fù)， 25 ℃ 黑暗條件下培養(yǎng)，觀察記錄。 將分離到的真菌分別進(jìn)行純化、鏡檢和轉(zhuǎn)管保存。根據(jù)真菌培養(yǎng)性狀和形態(tài)特征進(jìn)行鑒定。 驗(yàn)數(shù)據(jù)判定 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)判定按 170250 T 2016 8 附錄 B 種子質(zhì)量檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告單 檢測(cè)號(hào)： 字第 號(hào) 送驗(yàn)單位 送驗(yàn)日期 植物名稱 完成檢測(cè)日期 品種名稱 檢 驗(yàn) 員（簽字） 產(chǎn) 地 復(fù) 核 員（簽字） 凈 度 分 析 凈種子， % 其他植物種子， % 雜質(zhì)， % 其他植物種子的種類及數(shù)目： （完全 /有限 /簡(jiǎn)化檢驗(yàn)） 雜質(zhì)的種類： 發(fā) 芽 試 驗(yàn) 正常幼苗， % 不正常幼苗， % 新鮮不發(fā)芽種子， % 硬實(shí)， % 死種子， % 發(fā)芽床： ；溫度： ℃ ；試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間： d； 發(fā)芽前處理和方法 ： 水分 水分 % 其他 測(cè)定 項(xiàng)目 生活力 % 重量（千粒） g 健康狀況： 檢驗(yàn)結(jié)論或評(píng)語(yǔ)： □一級(jí) □二級(jí) □不合格 檢測(cè)單位（蓋章） _________________________________