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自身免疫性疾病的主要實驗檢測 張富強 自身免疫性疾病機體免疫系統(tǒng)受環(huán)境或遺傳等因素作用產生針對自身正常或變性的組織 器官 細胞 蛋白質或酶類等自身抗原的免疫應答 自身抗體或致敏T細胞 導致自身組織器官損傷或功能障礙所致的疾病 常見自身抗體的檢測抗核抗體的檢測與應用抗ENA抗體譜的檢測與應用與小血管炎相關的自身抗體檢測與應用與RA相關自身抗體的檢測與應用與自身免疫性肝病相關自身抗體的檢測與應用與橋本甲狀腺炎相關自身抗體的檢測與應用 抗核抗體的檢測與應用抗核抗體 antinuclearantibody 是一組將自身各種細胞核成分作為靶抗原的自身抗體總稱 主要是 也有l(wèi)gM lgA和lgD 無器官特異性 抗核抗體的命名 檢測方法 靈長類肝組織冷凍切片 與血清中 結合 再加入酶標抗人 復合物在熒光顯微鏡下觀察 常見 熒光染色模型 均質型 H 高滴度均質型主要見于SLE患者 顆粒型 S 高滴度的顆粒型常見于MCTD 同時也見于SLE 硬化癥 SS等 核膜型 M 主要見于原發(fā)性膽汁性肝硬化 核仁型 N 高滴度對診斷硬皮病具有一定特異性 常見自免的 檢出率 抗 抗體的檢測與應用檢測 綠蠅短膜蟲為基質的 法 高度特異性 蟲體動基體有環(huán)狀 不含其他核抗原 意義 患者的特征性標志抗體 的重要診斷標準之一 該抗體參與 的發(fā)病 形成多種冷沉淀而致血管炎 腎炎及典型的蝶形紅斑均與該抗體有關 從而該抗體的滴度的動態(tài)測定可監(jiān)控治療 但 抗體對 的敏感性僅為 抗體陰性不能排除 的診斷 抗核小體抗體 的檢測與應用 常用 法凋亡細胞產生核小體 患者的吞噬細胞清除能力受損 導致核小體大量積聚 產生抗核小體抗體 更早出現 臨床資料顯示 有 的抗 抗體陰性的 中 陽性 抗ENA抗體譜的檢測與應用抗ENA抗體譜 可提取核抗原抗體的總稱 臨床常檢測的主要包括 抗Sm抗體 SLE標記性抗體 30 40 陽性檢出率 抗nRNP抗體 MCTD95 陽性檢出率 高滴度 抗SSA Ro 抗SSB La抗體 SS陽性檢出率分別為 70 80 和40 抗SSB的特異性高于抗SSA 可達50 60 抗Sc1 70抗體 幾乎僅在PSS患者檢出 在PSS的陽性檢出率40 60 抗Jo 1抗體 常見于多發(fā)性肌炎DM 檢出率40 50 在PM DM檢出率25 單獨皮肌炎檢出率不足10 抗ACA抗體 與局限性系統(tǒng)性硬化癥有關 亦可見于原發(fā)性膽汁性肝硬化 PBC 免疫印跡技術 固相載體常為吸附有抗原的硝酸纖維膜 原理 ENA抗原經SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳 按分子量大小形成區(qū)帶 經標準參照物確定每一抗原區(qū)帶的分子量 然后轉印至硝酸纖維薄膜上制成抗原吸附載體膜 血管炎相關的自身抗體檢測與應用抗中性粒細胞胞漿抗體 ANCA 是一組以人中性粒細胞胞漿成分為靶抗原的自身抗體 是系統(tǒng)性血管炎的標志抗體 ANCA熒光染色型與靶抗原 ANCA的臨床應用 類風濕性關節(jié)炎相關自身抗體的檢測與應用RF 以變性lgG的Fc段為靶抗原 常見的RF有l(wèi)gM型 lgG lgA和lgE型 除RA之外的疾病中RF滴度較低 40IU ml 1 lgM型 80IU ml并伴有嚴重關節(jié)功能障礙時通常提示患者預后不良 2 lgG型與RA患者的滑膜炎 血管炎和關節(jié)癥狀密切相關 常伴隨lgM型同時出現 在正常人及非RA患者中很難檢出 3 lgA型與RA患者關節(jié)癥狀的嚴重程度及骨質破壞有顯著相關性 幾種疾病RF的檢出率 抗角蛋白抗體AKA主要見于RA患者 陽性率為30 55 特異性可達95 99 其他疾病中檢出率極低 AKA是判斷RA預后的一個標志性抗體 高滴度常提示疾病較為嚴重 AKA與RF很少平行出現 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體CCP ELISA法檢測 對RA的特異性為96 在RA早期階段就可測出 其特異性明顯高于RF 抗CCP陽性者更容易發(fā)生關節(jié)損害 自身免疫性肝病相關自身抗體的檢測與應用常見自身免疫性肝病 自身免疫性肝炎 原發(fā)性膽汁性肝硬化 原發(fā)性硬化性膽管炎 1 抗平滑肌抗體ASMA 是自身免疫性肝炎AIH的血清學標志抗體 陽性率90 高滴度1 1000時對AIH的特異性達100 AIH患者主要為lgG型 而在PBC與AIH重疊時 常以lgG和lgM同時出現 2 抗肝腎微粒體抗體LKM 1和抗肝細胞胞質抗體LC 1為2型AIH的特異性標志 3 抗可溶性肝抗原 肝胰抗原抗體 SLA LP 是AIH的最特異標志 但陽性檢出率只有10 30 但陽性預測值幾乎為100 4 抗線粒體抗體AMA AMA及其M2亞型是協(xié)助診斷PBC的特異性抗體 5 抗核點抗體 sp100 抗核膜抗體 gp210 自身免疫性肝病的自身抗體 橋本甲狀腺炎 HT 甲狀腺慢性炎性疾病 甲狀腺內淋巴細胞 漿細胞及巨噬細胞浸潤與組織損傷引起甲狀腺功能低下的重要原因 HT患者常出現 抗甲狀腺球蛋白抗體ATGA 抗甲狀腺微粒體抗體TMA 電化學發(fā)光法檢測 聯(lián)合檢測對HT的診斷陽性率可達98 自身免疫性疾病的相關實驗檢測1 免疫球蛋白檢測 自身抗體 免疫球蛋白 2 補體檢測 以II型 III型超敏反應機制發(fā)生的自身免疫性疾病中 補體參與反應 消耗大量補體 3 淋巴細胞檢測 淋巴細胞亞群的數量及功能反映免疫細胞的狀況 4 細胞因子的檢測 介導免疫應答和免疫反應或應用治療 抗IL 10單克隆抗體治療SLE 抗TNF 抗體治療RA 5 循環(huán)免疫復合物CIC的檢測 輔助診斷疾病