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1、 主講:蒲小燕單位:青海大學醫(yī)學院 組 織 學 ( histology) : 研 究 機 體 微 細 結 構 及 其 相 關 功 能 的 科 學 胚 胎 學 ( embryology) : 研 究 人 體 發(fā) 生 、 生 長 及 其 發(fā) 育 機 制 的 一 門 科 學 組織學緒論 Histology Introduction 三、組織學技術 一、 組織學的概念 二、顯微鏡的應用四 、組織學的學習方法 一、組織學的概念 機體的微細結構是用顯微鏡及其相關功能的科學 。(細胞、組織、器官、系統(tǒng))研究 紅細胞 白細胞 肌細胞 精子 神經(jīng)細胞 組織器官系統(tǒng) 細胞 細胞間質(zhì) (細胞外基質(zhì))+上皮組織結締組
2、織肌組織神經(jīng)組織成人有11015個細胞,約210種. 細胞膜 細胞質(zhì) 細胞核細胞提出組織建立形成21種 透 射 電 鏡 -觀 察 細 胞 內(nèi) 部 結 構 掃 描 電 鏡 -觀 察 組 織 或 細 胞 表 面 的 立 體 結 構電子顯微鏡光學顯微鏡解剖光學顯微鏡(放大鏡)組織光學顯微鏡1、顯微鏡的分類二、顯微鏡的應用0.2um物體放大1000倍 鏡下結構簡稱 LM 結構發(fā)明于16世紀0.2nm物體放大1000倍 鏡下結構簡稱 EM 結構發(fā)明于1932年2、顯微鏡的特點三、組織學技術 石蠟切片法(用于教學) 冷凍切片法(用于臨床檢驗) (肝、腎、淋巴結等)非切片法(牙齒、血液、疏松結締組織等)切片
3、法涂 片鋪片(撕片) 磨 片 取材(一)、石蠟切片法1、快速殺死動物取材。2、組織愈新鮮愈好。 3、材料大小一般不超過 0.5cm3。固定1、動物的組織在離體后便很快地進行解體 , 這些變化可能是由于細菌或是由于其 本身所含酶的作用。2、在動物死后應立即將其固定起來,停止其分解作用 , 盡可能保存其結構及成分,并能抵抗各個步驟處理時所產(chǎn)生的損壞作用。 3、常用的固定液有 10% 福爾馬林 , Bouin 液 , 苦味酸、乙醇。4、固定時間為24小時-很長。沖洗1、用水將固定液置換。2、時間為24小時。脫水1、組織必須先脫去水分 , 才能包埋于蠟中。2、脫水的步驟是陸續(xù)經(jīng) 70% 、 80% 、
4、 90% 、 95% 、 100 % 各級酒精 , 以去凈組織塊內(nèi)的水分 , 并完全由酒精所代替 。3、時間為3-6小時 透明1、因石蠟不溶于 酒精而溶于二甲苯 , 因而再用二甲苯替代酒精 , 同時因組織浸于油質(zhì)二甲苯 中也就變得透明了。2、時間為24小時。 浸蠟1、將透明好的組織快放入溶化 的石蠟中,置于保溫箱。2、時間為35小時。包埋最后把組織放在保持于 52 58C 的已溶解的石蠟中,置于常溫下。 切片待冷卻后就變成堅硬的組織蠟塊 , 便可以進行切片了。 貼片染色(二)染色方法 蘇 木 精(H ematoxylin)伊 紅(Eosin)堿 性 染 料將 嗜 堿 性 物 質(zhì)(本 身 酸 性
5、)染 成 藍 色 酸 性 染 料將 嗜 酸 性 物 質(zhì)(本 身 堿 性)染 成 紅 色細 胞 核 中 的 DNA、RNA,細 胞質(zhì) 中的RNA 細 胞 質(zhì)、膜 性 結 構(線 粒 體、溶 酶 體、滑 面 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng))(嗜堿性) (嗜酸性) Giemsa染色 、銀染色特殊染色:HE染色: 嗜中性巨噬細胞 消化分解1、形態(tài)結構和功能的關系3、立體和斷面的關系5、前后聯(lián)系,對比總結功能(有溶酶體)四、組織學的學習方法2、理論和實踐的關系4、靜態(tài)與動態(tài) 多 糖 PA氧 化 醛 Schiff試 劑 紫 紅 色 沉 淀五、 H istochemistry and Cytochemistry 組織化學與細胞
6、化學 試劑 + 組織中待檢物質(zhì) 有色沉淀 (多糖、酶、脂類、核酸) ( periodic acid Schiff reaction): 是確定組織或細胞中有無多糖的方法。 原理:PAS反應 單柱上皮不同方位的切片圖 結構與功能舒張狀態(tài)收縮狀態(tài) 靜態(tài)與動態(tài) 綜合與比較 細胞膜 ( 一 ) 、 cytoplasm 基 質(zhì) 核 糖 體 ribosome 細 胞 器 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng) ER 高 爾 基 復 合 體 G olgi 溶 酶 體 Lys 線 粒 體 Mit 過 氧 化 物 酶 體 peroxisome 中 心 體 centrosome 細 胞 骨 架 cytoskeleton 包 含 物 :糖 原 、 脂 滴 、 分 泌 顆 粒 線 粒 體 Mit : 能 量 供 應 站 線 粒 體粗 面 內(nèi) 質(zhì) 網(wǎng)